شماره ركورد
26067
شماره راهنما
BIO3 218
عنوان
بررسي اثرات ضد ميكروبي تركيبات مختلف بر تشكيل بيوفيلم باكتري پروتئوس ميرابيليس جداسازي شده از بيماران مبتلا به عفونت ادراري در اصفهان در سال¬هاي 1400-1401
مقطع تحصيلي
دكتري
رشته تحصيلي
ميكروبيولوژي
دانشكده
علوم و فناوريهاي زيستي
تاريخ دفاع
1405/05/04
صفحه شمار
153 ص .
استاد راهنما
فاتح رحيمي
استاد مشاور
محمد كتولي , علي قاسمي
كليدواژه فارسي
پروتئوس ميرابيليس , عفونت ادراري , بيوفيلم , مقاومت آنتيبيوتيكي , نانوذرات نقره , سامبوكوس ابولوس , ERIC-PCR
چكيده فارسي
مقدمه و هدف: پروتئوس ميرابيليس يكي از عوامل شايع و مهم عفونتهاي دستگاه ادراري پيچيده، بهويژه عفونتهاي وابسته به كاتتر، است كه توانايي بالاي آن در تشكيل بيوفيلم كريستالي، برخورداري از مجموعه گستردهاي از فاكتورهاي بيماريزايي، و مقاومت فزاينده به آنتيبيوتيكهاي متعدد، درمان آن را با چالش جدي روبهرو كرده است. با توجه به محدوديت روزافزون گزينههاي درماني مؤثر، اين مطالعه با دو هدف اصلي طراحي شد: نخست، تعيين ويژگيهاي فنوتيپي و ژنوتيپي سويههاي باليني پروتئوس ميرابيليس در اصفهان از نظر توانايي بيوفيلمزايي، الگوي مقاومت آنتيبيوتيكي، فراواني ژنهاي بيماريزا و بتالاكتامازي، و تنوع كلونال؛ و دوم، ارزيابي فعاليت ضدباكتريايي و ضدبيوفيلمي عصاره آبي گياه سامبوكوس ابولوس و نانوذرات نقره سنتزشده به روش سبز از آن، بهعنوان راهبردي جايگزين يا مكمل در برابر اين پاتوژن.
مواد و روشها: در اين مطالعه مقطعي-تجربي، 104 سويه باليني پروتئوس ميرابيليس از بيماران مبتلا به عفونت ادراري در اصفهان جمعآوري شد. حساسيت آنتيبيوتيكي نسبت به 17 آنتيبيوتيك با روش ديسكديفيوژن و توليد فنوتيپي ESBL و ESCR ارزيابي گرديد. توانايي تشكيل بيوفيلم با روش كريستال ويوله در ميكروتيترپليت سنجش شد. حضور 17 ژن بيماريزا و مرتبط با بيوفيلم (شامل zapA، zapD، ureC، ureR، luxS، rsbA، acrA، acrB، mrpA، mrpH، pmfA، atfA، uca، pta، rsmA، hmpA و hlyA)، بههمراه ژنهاي بتالاكتامازي طيفگسترده و كارباپنمازي، با روش PCR، و تنوع ژنتيكي سويهها با روش ERIC-PCR بررسي شد. در بخش درماني، پس از غربالگري هفت گياه دارويي، عصاره آبي سامبوكوس ابولوس بهعنوان مؤثرترين گزينه انتخاب و براي سنتز سبز نانوذرات نقره بهكار رفت؛ اين نانوذرات با UV-Vis، TEM وXRD مشخصهيابي شدند. فعاليت ضدباكتريايي (MIC/MBC)، ضدبيوفيلمي، ضدچسبندگي، ضدتهاجمي (بر سلولهايپ HEK293) و زيستسازگاري سلولي عصاره و نانوذره، بهتنهايي و بهصورت تركيبي، ارزيابي و اثر آنها بر بيان ژنهايzapA و zapD با Real-time PCR سنجيده شد. همچنين، برهمكنش تركيبات فيتوشيميايي غالب عصاره با آنزيم اورهآز از طريق داكينگ مولكولي بررسي شد.
كليدواژه لاتين
Proteus mirabilis , Urinary tract infection , Biofilm , Antimicrobial resistance , Silver nanoparticles , Sambucus ebulus , ERIC-PCR
عنوان لاتين
Study of the antibacterial effects of different compounds on biofilm formation of Proteus mirabilis isolated from patients with urinary infection in Isfahan during 2021-2022
گروه آموزشي
زيست شناسي سلولي مولكولي و ميكروبيولوژي
چكيده لاتين
Background and Objective: Proteus mirabilis is a major cause of complicated urinary tract infections (UTIs), particularly catheter-associated infections. Its remarkable ability to form crystalline biofilms, together with its broad repertoire of virulence factors and increasing multidrug resistance, poses substantial therapeutic challenges. Given the growing limitations of conventional antimicrobial therapy, this study aimed to (i) characterize the phenotypic and genotypic features of clinical P. mirabilis isolates from Isfahan with respect to biofilm-forming capacity, antimicrobial resistance, virulence and β-lactamase gene distribution, and clonal diversity, and (ii) evaluate the antibacterial and antibiofilm potential of Sambucus ebulus aqueous extract and its green-synthesized silver nanoparticles as an alternative or adjunctive strategy against this pathogen.
Materials and Methods: In this cross-sectional experimental study, 104 clinical P. mirabilis isolates were collected from patients with UTIs in Isfahan, Iran. Antimicrobial susceptibility to 17 antibiotics was determined by the disk diffusion method, and ESBL and ESCR phenotypes were evaluated. Biofilm formation was quantified using the crystal violet microtiter plate assay. Seventeen virulence- and biofilm-associated genes (zapA, zapD, ureC, ureR, luxS, rsbA, acrA, acrB, mrpA, mrpH, pmfA, atfA, uca, pta, rsmA, hmpA, and hlyA), together with extended-spectrum β-lactamase and carbapenemase genes, were detected by PCR, while clonal diversity was assessed by ERIC-PCR. Following the screening of seven medicinal plants, S. ebulus aqueous extract was selected as the most active candidate for the green synthesis of silver nanoparticles, which were characterized by UV-Vis spectroscopy, TEM, and XRD. The antibacterial (MIC/MBC), antibiofilm, anti-adhesive, anti-invasive (against HEK293 cells), and cytocompatibility of the extract and nanoparticles, individually and in combination, were evaluated. Their effects on zapA and zapD gene expression were determined by real-time PCR. In addition, molecular docking analysis was performed to investigate the interactions between the major phytochemical constituents of the extract and the urease enzyme.
تعداد فصل ها
4
فهرست مطالب pdf
166665
نويسنده