• شماره ركورد
    24932
  • شماره راهنما
    BIO2 1078
  • عنوان

    ارزيابي قابليت ترميم زخم با استفاده از تركيب سه عنصر: داربست (پرده آمنيوتيك/هيدروژل)، سلول (سلول‌هاي بنيادي و فيبروبلاست) و فاكتور‌هاي محلول (محيط‌كشت شرطي)

  • مقطع تحصيلي
    كارشناسي ارشد
  • رشته تحصيلي
    زيست شناسي جانوري- سلولي و تكويني
  • دانشكده
    علوم و فناوري‌‌‌هاي زيستي
  • تاريخ دفاع
    1404/6/26
  • صفحه شمار
    56 ص.
  • استاد راهنما
    فريبا اسماعيلي كتكي
  • استاد مشاور
    فاطمه رفيع منزلت
  • كليدواژه فارسي
    ترميم‌زخم , بافت‌پوست‌مهندسي¬‌شده , محيط‌كشت‌شرطي , غشاي‌آمنيوتيك , هيدروژل
  • چكيده فارسي
    زخم‌هاي پوستي‌ به عنوان چالشي مهم در حوزه زيستي، پزشكي و ترميم بافت‌اند كه نيازمند روش‌هاي درماني مؤثر و بهينه براي تسريع فرآيند بازسازي و جلوگيري از عوارض مزمن هستند. ترميم‌زخم يك فرآيند پويا است كه در اين فرآيند، انواع مختلفي از سلول‌ها از جمله كراتينوسيت‌ها، فيبروبلاست‌ها، ماكروفاژها و پلاكت‌ها نقش دارند و هرگونه اختلال در اين سيستم مي‌تواند منجر به مزمن شدن زخم شود. علم مهندسي بافت بر اساس سه مؤلفه اصلي شامل داربست، سلول و مولكول‌هاي زيست فعال تلاش مي‌كند با بهره‌گيري از توانايي‌هاي تكثير و تمايز سلول‌هاي مختلف، به ويژه سلول‌هاي بنيادي و قرار دادن آن‌ها در داربست‌هاي متنوع با ويژگي‌هاي زيست‌سازگار، همراه‌با استفاده‌از مولكول‌هاي زيست فعال، بافت‌هاي آسيب‌ديده و از دست‌رفته را ترميم كرده و عملكرد آن‌ها را احيا كنند. در اين مطالعه، رت‌هاي نر نژاد ويستار تهيه و در آن‌ها زخم ايجاد شد و تأثير غشاي آمنيوتيك بي‌سلول، هيدروژل، سلول‌هاي فيبروبلاست و محيط‌كشت شرطي بر روند ترميم زخم مورد ارزيابي قرار‌گرفت. ارزيابي‌هاي مختلفي شامل اندازه‌گيري درصد انقباض‌زخم، ضخامت‌اپيدرم، ميزان تجمع كلاژن و فعاليت تكثير‌سلولي انجام شد. براي اين منظور، از روش‌هاي رنگ‌آميزي عمومي هماتوكسيلين-ائوزين، رنگ‌آميزي اختصاصي تري‌كروم‌ماسون و روش ايمونوفلورسانس با نشانگر هسته‌اي DAPI و آنتي‌بادي‌هاي Ki-67 و Cy5.29 بهره گرفته‌شد. نتايج نشان داد كه گروه غشاي آمنيوتيك بي‌سلول به تنهايي، به دليل فقدان سلول‌هاي زنده و فاكتورهاي زيستي فعال، تأثير محدود و غيرمعني‌داري بر بهبود زخم داشت. اما استفاده تركيبي از غشاي بي‌سلول همراه با هيدروژل، هيدروژل به تنهايي، فيبروبلاست و محيط كشت شرطي باعث افزايش معنادار درصد انقباض زخم، ضخامت اپيدرم، سنتز كلاژن و فعاليت تقسيم سلولي شد. گروه محيط كشت شرطي بيشترين ميزان تجمع كلاژن و بالاترين فعاليت تكثير سلولي را نشان داد كه بيانگر نقش كليدي فاكتورهاي رشد و تعامل پيچيده سلولي در فرايندهاي ترميم بافتي است. هيدروژل نيز با ايجاد محيط سه‌بعدي مرطوب و فراهم كردن شرايط بهينه براي مهاجرت و تمايز سلول‌ها، بهبود مناسبي در بازسازي اپيدرمي و ماتريكس خارج‌سلولي ايجاد كرد. بنابراين، يافته‌هاي اين تحقيق تأكيد مي‌كند كه بهره‌گيري از تركيب زيست‌مواد حمايتي و سلول‌هاي زنده، به طور مؤثري روندهاي مولكولي و سلولي بازسازي زخم را تسريع مي‌كند و مي‌تواند به توسعه روش‌هاي درماني نوين و مؤثر در ترميم بافت‌هاي آسيب‌ديده منجر شود.
  • كليدواژه لاتين
    Wound healing , Engineered skin tissue , Conditioned medium , Amniotic membrane , Hydrogel
  • عنوان لاتين
    eva‎luation of wound healing ability using the combination of three elements: scaffold (amniotic membrane / hydrogel), cell (stem cells an‎d fibroblasts) an‎d soluble factors (conditioned medium)
  • گروه آموزشي
    زيست شناسي گياهي و جانوري
  • چكيده لاتين
    Effective an‎d optimized therapeutic approaches are essential to accelerate the biological regeneration process an‎d prevent chronic complications. Wound healing is a dynamic process involving various cell types, including keratinocytes, fibroblasts, macrophages, an‎d platelets, where any disruption in this system can lead to chronic wound formation. Tissue engineering science, based on three main components—scaffolds, cells, an‎d bioactive molecules—aims to repair damaged an‎d lost tissues an‎d restore their function by utilizing the proliferative an‎d differentiation capabilities of various cells, particularly stem cells, incorporated into diverse biocompatible scaffolds, alongside the application of bioactive molecules. In this study, male Wistar rats were prepared an‎d wounds were induced. The effects of acellular amniotic membrane, hydrogel, fibroblast cells, an‎d conditioned medium on the wound healing process were eva‎luated. Various assessments were conducted, including measurement of wound contraction percentage, epidermal thickness, collagen deposition, an‎d cellular proliferation activity. For this purpose, general hematoxylin-eosin staining, specific Massonʹs trichrome staining, an‎d immunofluorescence methods utilizing the nuclear marker DAPI an‎d antibodies against Ki-67 an‎d Cy5.29 were employed. The results demonstrated that the acellular amniotic membrane group alone had a limited an‎d non-significant effect on wound healing due to the absence of viable cells an‎d active biological factors. However, the combined application of the acellular membrane with hydrogel, hydrogel alone, fibroblasts, an‎d conditioned medium significantly increased wound contraction percentage, epidermal thickness, collagen synthesis, an‎d cellular proliferation activity. The conditioned medium group exhibited the highest collagen accumulation an‎d cellular proliferation activity, highlighting the critical role of growth factors an‎d complex cellular interactions in tissue repair processes. The hydrogel also contributed to enhanced epidermal an‎d extracellular matrix regeneration by providing a three-dimensional hydrated environment an‎d optimal conditions for cell migration an‎d differentiation. Therefore, the findings of this study emphasize that utilizing a combination of supportive biomaterials an‎d viable cells effectively accelerates molecular an‎d cellular mechanisms of wound regeneration an‎d may lead to the development of novel an‎d effective therapeutic strategies for repairing damaged tissues.
  • تعداد فصل ها
    4
  • فهرست مطالب pdf
    143445
  • نويسنده

    يوسفيان، زهرا