شماره ركورد
24932
شماره راهنما
BIO2 1078
عنوان
ارزيابي قابليت ترميم زخم با استفاده از تركيب سه عنصر: داربست (پرده آمنيوتيك/هيدروژل)، سلول (سلولهاي بنيادي و فيبروبلاست) و فاكتورهاي محلول (محيطكشت شرطي)
مقطع تحصيلي
كارشناسي ارشد
رشته تحصيلي
زيست شناسي جانوري- سلولي و تكويني
دانشكده
علوم و فناوريهاي زيستي
تاريخ دفاع
1404/6/26
صفحه شمار
56 ص.
استاد راهنما
فريبا اسماعيلي كتكي
استاد مشاور
فاطمه رفيع منزلت
كليدواژه فارسي
ترميمزخم , بافتپوستمهندسي¬شده , محيطكشتشرطي , غشايآمنيوتيك , هيدروژل
چكيده فارسي
زخمهاي پوستي به عنوان چالشي مهم در حوزه زيستي، پزشكي و ترميم بافتاند كه نيازمند روشهاي درماني مؤثر و بهينه براي تسريع فرآيند بازسازي و جلوگيري از عوارض مزمن هستند. ترميمزخم يك فرآيند پويا است كه در اين فرآيند، انواع مختلفي از سلولها از جمله كراتينوسيتها، فيبروبلاستها، ماكروفاژها و پلاكتها نقش دارند و هرگونه اختلال در اين سيستم ميتواند منجر به مزمن شدن زخم شود. علم مهندسي بافت بر اساس سه مؤلفه اصلي شامل داربست، سلول و مولكولهاي زيست فعال تلاش ميكند با بهرهگيري از تواناييهاي تكثير و تمايز سلولهاي مختلف، به ويژه سلولهاي بنيادي و قرار دادن آنها در داربستهاي متنوع با ويژگيهاي زيستسازگار، همراهبا استفادهاز مولكولهاي زيست فعال، بافتهاي آسيبديده و از دسترفته را ترميم كرده و عملكرد آنها را احيا كنند.
در اين مطالعه، رتهاي نر نژاد ويستار تهيه و در آنها زخم ايجاد شد و تأثير غشاي آمنيوتيك بيسلول، هيدروژل، سلولهاي فيبروبلاست و محيطكشت شرطي بر روند ترميم زخم مورد ارزيابي قرارگرفت.
ارزيابيهاي مختلفي شامل اندازهگيري درصد انقباضزخم، ضخامتاپيدرم، ميزان تجمع كلاژن و فعاليت تكثيرسلولي انجام شد. براي اين منظور، از روشهاي رنگآميزي عمومي هماتوكسيلين-ائوزين، رنگآميزي اختصاصي تريكرومماسون و روش ايمونوفلورسانس با نشانگر هستهاي DAPI و آنتيباديهاي Ki-67 و Cy5.29 بهره گرفتهشد.
نتايج نشان داد كه گروه غشاي آمنيوتيك بيسلول به تنهايي، به دليل فقدان سلولهاي زنده و فاكتورهاي زيستي فعال، تأثير محدود و غيرمعنيداري بر بهبود زخم داشت. اما استفاده تركيبي از غشاي بيسلول همراه با هيدروژل، هيدروژل به تنهايي، فيبروبلاست و محيط كشت شرطي باعث افزايش معنادار درصد انقباض زخم، ضخامت اپيدرم، سنتز كلاژن و فعاليت تقسيم سلولي شد.
گروه محيط كشت شرطي بيشترين ميزان تجمع كلاژن و بالاترين فعاليت تكثير سلولي را نشان داد كه بيانگر نقش كليدي فاكتورهاي رشد و تعامل پيچيده سلولي در فرايندهاي ترميم بافتي است. هيدروژل نيز با ايجاد محيط سهبعدي مرطوب و فراهم كردن شرايط بهينه براي مهاجرت و تمايز سلولها، بهبود مناسبي در بازسازي اپيدرمي و ماتريكس خارجسلولي ايجاد كرد.
بنابراين، يافتههاي اين تحقيق تأكيد ميكند كه بهرهگيري از تركيب زيستمواد حمايتي و سلولهاي زنده، به طور مؤثري روندهاي مولكولي و سلولي بازسازي زخم را تسريع ميكند و ميتواند به توسعه روشهاي درماني نوين و مؤثر در ترميم بافتهاي آسيبديده منجر شود.
كليدواژه لاتين
Wound healing , Engineered skin tissue , Conditioned medium , Amniotic membrane , Hydrogel
عنوان لاتين
evaluation of wound healing ability using the combination of three elements: scaffold (amniotic membrane / hydrogel), cell (stem cells and fibroblasts) and soluble factors (conditioned medium)
گروه آموزشي
زيست شناسي گياهي و جانوري
چكيده لاتين
Effective and optimized therapeutic approaches are essential to accelerate the biological regeneration process and prevent chronic complications. Wound healing is a dynamic process involving various cell types, including keratinocytes, fibroblasts, macrophages, and platelets, where any disruption in this system can lead to chronic wound formation. Tissue engineering science, based on three main components—scaffolds, cells, and bioactive molecules—aims to repair damaged and lost tissues and restore their function by utilizing the proliferative and differentiation capabilities of various cells, particularly stem cells, incorporated into diverse biocompatible scaffolds, alongside the application of bioactive molecules.
In this study, male Wistar rats were prepared and wounds were induced. The effects of acellular amniotic membrane, hydrogel, fibroblast cells, and conditioned medium on the wound healing process were evaluated. Various assessments were conducted, including measurement of wound contraction percentage, epidermal thickness, collagen deposition, and cellular proliferation activity. For this purpose, general hematoxylin-eosin staining, specific Massonʹs trichrome staining, and immunofluorescence methods utilizing the nuclear marker DAPI and antibodies against Ki-67 and Cy5.29 were employed.
The results demonstrated that the acellular amniotic membrane group alone had a limited and non-significant effect on wound healing due to the absence of viable cells and active biological factors. However, the combined application of the acellular membrane with hydrogel, hydrogel alone, fibroblasts, and conditioned medium significantly increased wound contraction percentage, epidermal thickness, collagen synthesis, and cellular proliferation activity.
The conditioned medium group exhibited the highest collagen accumulation and cellular proliferation activity, highlighting the critical role of growth factors and complex cellular interactions in tissue repair processes. The hydrogel also contributed to enhanced epidermal and extracellular matrix regeneration by providing a three-dimensional hydrated environment and optimal conditions for cell migration and differentiation.
Therefore, the findings of this study emphasize that utilizing a combination of supportive biomaterials and viable cells effectively accelerates molecular and cellular mechanisms of wound regeneration and may lead to the development of novel and effective therapeutic strategies for repairing damaged tissues.
تعداد فصل ها
4
فهرست مطالب pdf
143445
نويسنده