24169

BIOMED2 228

كارشناسي ارشد

مهندسي پزشكي-بيومواد

فني و مهندسي

1403/02/31

138 ص.

دكتر محسن صراف بيد آباد

الكتروكمي لومينسانس , آنتي بادي , HIV , استرپتوآويدين , بيوتين , نانوذرات مغناطيسي آهن , پوشش طلا , CD8

فناوري نانو در طيف گسترده‌اي از زمينه‌ها از جمله فيزيك كاربردي تا بيوتكنولوژي و پزشكي پيشرفت قابل توجهي داشته است. روش‌هاي الكتروكمي لومينسانس (ECL) مبتني بر نانو ذرات (NPs) به دليل سميت كم، سازگاري زيستي بالا و خواص نوري منحصر به‌فرد، در مطالعات بيولوژيكي توجه زيادي را به خود جلب كرده‌اند. در اين پژوهش، كيت تشخيصي الكتروكمي‌لومينسانس 8CD مبتني بر نانوذرات مغناطيسي براي تشخيص كمي هورمون 8CD توسعه و ساخته شد. جز اول كيت شامل نانوذرات آهن پوشش داده شده با طلا و آنتي بادي اوليه، و جز دوم كيت شامل آنتي بادي ثانويه متصل به HRP بود. جهت ساخت جز اول كيت، نانوذرات مغناطيسي آهن (Fe3O4) با موفقيت با استفاده از محلول كلريد آهن (II) و (III) به روش هم‌رسوبي سنتز گرديد. سپس سطح آن با افزودن محلول سديم سيترات با گروه‌هاي كربوكسيل اصلاح شد. در مرحله دوم، نانوذرات اكسيد آهن-سيترات با نانوذره طلا پوشش داده‌ شد. در مرحله سوم آنتي‌بادي اوليه برعليه CD8 با كمك فعالسازي گروه كربوكسيل و آمين به نانوذرات مغناطيسي آهن-طلا (Fe3O4-Au) متصل شد. در مرحله چهارم آنتي‌بادي ثانويه برعليه CD8 به HRP متصل شد. از مشخصه‌يابي طيف‌سنجي مادون قرمز تبديل فوريه (FTIR) براي اثبات سنتز خالص نانوذرات آهن و اثبات پوشش‌دهي با طلا و اتصال آنتي‌بادي اوليه به نانوذرات آهن پوشش داده شده با طلا استفاده شد. از مشخصه‌يابي پراكندگي ديناميك نور (DLS) براي اندازه‌گيري قطر هيدروديناميكي نمونه نانوذره آهن و نانوذره آهن سيتراته، از آناليز پلاسماي جفت‌شده القايي (ICP-MS) براي اندازه‌گيري ميزان غلظت عناصر آهن و طلا در نمونه نانوذره آهن پوشش داده شده با طلا و از طيف‌سنج UV-Visible براي بررسي تشكيل پوشش‌ طلا روي سطوح نانوذرات مغناطيسي آهن استفاده شد. همچنين از روش برادفورد براي اندازه‌گيري غلظت آنتي‌بادي اوليه و آنتي‌بادي ثانويه پس از اتصال به نانوذره و HRP استفاده شد. درنهايت، ميزان نورسنجي كيت توليد شده توسط دستگاه ECL ساخته شده در هسته گروه مورد ارزيابي جهت تشخيص غلظت CD8 در سرم افراد داوطلب مورداستفاده قرار گرفت. نتايج حاصل از آزمايشات غلظت متفاوتي از CD8 را در سرم داوطلبان نشان داد. نتايج نشان داد كه كيت با ولتاژ مناسب 5 ميلي‌ولت قادر به تشخيص 8CD در سرم افراد داوطلب بود.

Electrochemiluminescence , Antibody , HIV , Streptavidin , Biotin , Magnetic iron nanoparticles , Gold coating , CD8

Designing and fabricating magnetic nanoparticles and functionalising their surfaces as targeted tracers for use in selective identification kits for CD8 hormone in luminescent bioimmunosensors

مهندسي پزشكي

Nanotechnology has significantly advanced in a wide range of fields, from applied physics to biotechnology and medicine. Electrochemiluminescence (ECL) methods based on nanoparticles (NPs) have attracted considerable attention in biological studies due to their low toxicity, high biological compatibility, and unique optical properties. In this research, an electrochemiluminescence CD8 diagnostic kit based on magnetic nanoparticles was developed for the quantitative detection of the CD8 hormone. The kit consisted of iron-coated gold nanoparticles with primary antibodies as the first part and secondary antibodies attached to HRP as the second part. The results showed that the kit was able to detect CD8 in the serum of volunteers at an appropriate voltage of 5 millivolts.

5