24157

BIO2 1041

كارشناسي ارشد

زيست شناسي- سلولي و مولكولي

علوم و فناوري‌‌‌هاي زيستي

1403/07/03

47 ص.

سهيلا رهگذر

سرطان خون لنفوبلاستي حاد كودكان , ميكروRNA , miR-326 , اگزوزوم

لوسمي لنفوبلاستي حاد (ALL) يك سرطان خوني تهاجمي است كه داراي بيشترين شيوع در دوران كودكي مي‌باشد. miR-326 به تازگي به عنوان يك سركوبگر تومور در ALL كودكان مطرح شده و از طرفي مقادير بياني افزاينده اين ميكروRNA در اگزوزوم‌هاي استخراج‌شده از كودكان مبتلا به B-ALL به اثبات رسيده است. هدف از انجام اين پژوهش مطالعه عملكرد رده‌ي سلولي RN95 B-ALL در مواجهه با القاي miR-326 اگزوژن از طريق بررسي ميزان بيان اين ميكروRNA در اگزووزم‌هاي ترشحي بود. سلول‌هاي RN95 متعاقب الكتروپوريشن با مقلد miR-326 ترنسفكت شدند. پس از استخراج اگزوزوم‌ها از محيط كشت سلول بيان نسبيmiR-326 در آن‌ها با استفاده از RT-qPCR اندازه‌گيري شد. نتايج نشان داد كه افزايش بيان miR-326 در سلول منجر به افزايش بيان آن در اگزوزوم‌هاي ترشحي مي‌شود. اين افزايش بيان وابسته به زمان بوده و هرچه از زمان ترنسفكشن بيشتر ‌گذشت بيان miR-326 در سلول‌ها كمتر و مقادير آن در اگزوزوم‌هاي ترشح‌شده توسط سلول بيشتر شد. با درنظرگرفتن داده‌هاي اين پژوهش مشخص شد لنفوبلاستهاي بدخيم B-ALL جهت فراهم نمودن شرايط رشد و تكثير خود و رهايي از عملكرد مقادير اگزوژن miR-326 ، كه به عنوان يك اقدام درماني به سلول عرضه شدند، اين سركوبگر تومور را از طريق اگزوزوم‌ها به فضاي خارج سلولي انتقال مي‌دهد. احتمال دارد سلول بدخيم جهت كاهش بيان miR-326 سيتوپلاسمي از مكانيسمهاي ديگري نيز، مانند اقزايش بيان LncRNA ، استفاده نمايد. بررسي بيشتر در اين زمينه نياز به انجام مطالعات گسترده تر دارد. نتايج حاصل از اين پژوهش نكات جديدي را در خصوص عملكرد سلولهاي توموري مشخص كرد كه مي تواند در راستاي بهبود روند درمان كودكان مبتلا به ALL مورد استفاده قرار گيرد.

childhood acute lymphoblastic leukemia , microRNA , miR-326 , exosome

Assessment of the response of malignant acute lymphoblastic leukemia cells increased expression of ectopic miR-326

زيست شناسي سلولي مولكولي و ميكروبيولوژي

Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a highly aggressive blood cancer that is most commonly found in children. miR-326 has recently been proposed as a tumor suppressor in pediatric ALL, while on the other hand, increased expression levels of this microRNA have been demonstrated in exosomes extracted from children with B-ALL. The aim of this research was to study the function of RN95 B-ALL cell line in response to the exogenousmiR-326 by examining the expression levels of this microRNA in secretory exosomes. RN95 cells were transfected with miR-326 mimic following electroporation. Exosomes were extracted from the cell culture media and the relative expression levels of miR-326 was measured using RT-qPCR. The results showed that increased expression of cytoplasmic miR-326 lead to its increased expression in the secretory exosomes. This increase was time-dependent, and the longer was the transfection time, the lower was the expression of cytoplasmic miR-326, and the higher was the amount of miR-326 in the exosomes. Considering the data of this research, it was determined that, in order to provide the conditions for their growth and proliferation, B-ALL malignant lymphoblasts exclude the exogenic tumor suppressor miR-326, transfected for therapeutic purposes, form the cell by the secreted exosomes. Other confronting mechanisms aiming to reduce the exogenic miR-326 may be further involved including increasing expression levels of lncRNAs. Further investigation in this area necessitates the conduct of more extensive studies. The results obtained from this research revealed new insights regarding the functionality of tumor cells, that could be leveraged to improve the treatment processes for children with ALL.

4