-
شماره ركورد
23703
-
شماره راهنما
BIO2 1024
-
نويسنده
نيايش، حسنا
-
عنوان
بررسي بيان ژن CAMK2N1 در نئوپلاسم تيروئيد در جمعيت اصفهان
-
مقطع تحصيلي
كارشناسي ارشد
-
رشته تحصيلي
زيست شناسي سلولي مولكولي - ژنتيك
-
دانشكده
علوم و فناوريهاي زيستي
-
تاريخ دفاع
1403/04/10
-
صفحه شمار
97 ص.
-
استاد راهنما
سيد مرتضي جوادي راد
-
استاد مشاور
محسن كلاهدوزان
-
كليدواژه فارسي
نئوپلاسم تيروئيد , CAMK2N1 , RT-qPCR
-
چكيده فارسي
نئوپلاسم تيروئيد، شايعترين بدخيمي سيستم درونريز در انسان است و فراوانترين نوع آن سرطان پاپيلاري تيروئيد (PTC) ميباشد. با توجه بهسرعت افزايش ابتلا به اين نئوپلاسم، پيشبيني ميشود اين بيماري به چهارمين نوع شايع سرطان در سراسر جهان تبديل شود. مكانيسم ژنتيكي بروز PTC بهطور كامل مشخص نيست. بنابراين يافتن ژنهاي مهم دخيل در بروز اين بيماري ميتواند از اهميت بالايي برخوردار باشد. آناليز دادههاي حجيم زيستي از جمله دادههاي ريز آرايه (Microarray) ميتواند براي يافتن ژن هاي با بيان متفاوت بين نمونههاي بيمار و سالم، بسيار حائز اهميت باشد. در اين مطالعه تعداد 12GSE از پايگاه داده NCBI GEO بارگذاري شدند. سپس نرمال سازي دادهها به روش Log2 Transformation و Quantile Normalization انجام شد. بر اين اساس با انجام آناليز بر روي دادههاي ميكرواري و با استفاده از بستهي Limma به ژنهاي با بيان متفاوت (DEG) دست پيدا كرديم. سپس با اشتراك گيري ميان ژنهاي مشترك مربوط به اين آناليزها، ژنهاي كليدي معنيدار (p.value < 0.05) با بيان متفاوت ميان بافتهاي PTC و بافت نرمال مجاور به دست آمد. در بررسيهاي آزمايشگاهي، ميزان بيان ژن CAMK2N1 در 20 نمونه، شامل 10 نمونه تومور PTC و 10 نمونه بافت سالم مجاور تومور، با تكنيك RT-qPCR بررسي شد. به منظور طراحي پرايمرها از دو نرمافزار بيكون ديزاينر 8.1 و اليگو 7 استفاده شد. با تعيين نواحي تلاقي اگزونها، طراحي تقاطع پرايمرها انجام شد. همچنين بهينه سازي دماي Tm نيز صورت گرفت. انجام مرحلهي RT-qPCR در اين پژوهش با استفاده از دستگاه Rotor-Gene Q و به كمك رنگ فلوئورسنت سايبر گرين انجام شد. نتايج حاصل اين ارزيابي با استفاده از نرمافزار REST 2009 مورد تجزيهوتحليل آماري قرار گرفت. بر اساس نتايج بهدستآمده، افزايش بيان معنيدار 596/3 برابري ژن CAMK2N1 در نمونههاي PTC در مقايسه با بافت سالم مشاهده شد (012/0p.value=). ميزان تغييرات بيان ژن CAMK2N1 در ارتباط با انواع واريته PTC، اندازه تومور، سن و سابقهي كم كاري تيروئيد در بيماران مبتلا به PTC، از لحاظ آماري معنيدار نبود. با اين حال افزايش بيان معنيدار 657/5 برابري ژن مذكور در نمونههاي PTC كه با متاستاز همراه بودند (N1) نسبت به نمونههاي PTC بدون متاستاز (N0) مشاهده شد ) 001/0(p.value=.
-
كليدواژه لاتين
thyroid neoplasm , CAMK2N1 , RT-qPCR
-
عنوان لاتين
Investigation of CAMK2N1 Gene Expression in Thyroid Neoplasms in the Isfahan Population
-
گروه آموزشي
زيست شناسي سلولي مولكولي و ميكروبيولوژي
-
چكيده لاتين
Thyroid neoplasm is the most common malignancy of the endocrine system in humans, and the most common type is papillary thyroid cancer (PTC). Due to the rapid increase in this neoplasm, it is predicted that this disease will become the most common type of cancer worldwide. The genetic mechanism of PTC is not fully understood. Therefore, finding key genes in this disease can be more important. Analyzing large biological data, including microarray data, can be very important to find genes with different expression in diseased and healthy samples. In this study, 12 GSEs were loaded from the NCBI GEO database. Then data normalization was done by Log2 Transformation and Quantile Normalization. Based on this, by analyzing the microarray data and using the Limma package, we found differentially expressed genes (DEG). Then, by dividing among the common genes related to these analyses, significant key genes (p.value < 0.05) with different expression between PTC tissues and adjacent normal tissue were obtained. In laboratory tests, the expression level of CAMK2N1 gene in 20 samples, including 10 PTC tumor samples and 10 healthy tissue samples adjacent to the tumor, was checked by RT-qPCR technique. In order to design the primers, Beacon Designer 8.1 and Oligo 7 software were used. By determining the crossing regions of the exons, the design of the intersection of the primers was done. Tm temperature was also optimized. The RT-qPCR step in this study was performed using the Rotor-Gene Q device and the help of SYBR Green fluorescent dye. The results of this evaluation were statistically analyzed using REST 2009 software. Based on the obtained results, a significant increase in the expression of CAMK2N1 gene by 3.596 times was observed in PTC samples compared to healthy tissue (p.value=0.012). The level of changes in CAMK2N1 gene expression in relation to PTC varieties, tumor size, age and history of hypothyroidism in PTC patients was not statistically significant. With this significant increase in expression 5.657 times was observed in PTC samples with metastasis (N1) compared to PTC samples without metastasis (N0) (p.value=0.001).
-
تعداد فصل ها
4
-
لينک به اين مدرک :